兩幕歌劇 | 作曲家: 唐尼采蒂 | 文本: 朱塞佩．巴達利

第一幕
- 西敏宮
英女王伊莉莎白一世為與法國結盟，正考慮法國國王的聯婚建議，而她卻暗地裡鍾情於還沒上朝的利斯特伯爵。陶博德為前蘇格蘭女王瑪麗求情，自從她逃離蘇格蘭後，便被軟禁於法瑟林蓋城堡。但伊莉莎白對赦免和釋放她的表妹一直猶疑不決。

利斯特來到，伊莉莎白要他把訂婚戒指送交法國國王，他欣然服從命令，對這任務無動於衷。利斯特收到瑪麗的求情信，她希望與伊莉莎白會面，冰釋前嫌。他將信函交給伊莉莎白，並積極的懇求她答允瑪麗的請求。伊莉莎白懷疑他愛上了她的政敵，在百般不願之下答應與瑪麗會面。

- 法瑟林蓋城堡內園
安娜伴着瑪麗在園中散步，她回憶起年少時在法國的快樂時光。聽見伊莉莎白駕臨的號角聲，瑪麗驚恐萬分，並後悔自己提出與伊莉莎白會面的請求。利斯特來到，說服她留下來面對伊莉莎白。

伊莉莎白心情矛盾，一方面要拒絕內務大臣薛思爾催促處死瑪麗的要求，另一方面利斯特為她的政敵說項，使她怒火中燒。瑪麗接受利斯特的建議，向伊莉莎白下跪求饒。但當聽夠了伊莉莎白的一再侮辱，她不理會利斯特的勸解，指責伊莉莎白是僭越王位的私生女。這次會面最後不歡而散。震怒的伊莉莎白讓瑪麗等候迎接死亡。

第二幕
- 西敏宮
雖然被狠狠的冒犯了，伊莉莎白仍然躊躇着，不願簽署死刑詔書。薛思爾嘗試以她的身心安寧和國家的穩定說服她。利斯特的到來，燃起了伊莉莎白強烈的妒火。她隨即簽下死刑詔書，更命令利斯特親自監斬。

- 瑪麗在法瑟林蓋的住處
薛思爾帶來死刑詔書，並宣告死刑的惡耗。瑪麗向陶博德懺悔參與謀殺親夫和策劃暗殺伊莉莎白的罪行。

- 刑房隔壁
瑪麗的朋友為她的坎坷命運感到悲傷。她向利斯特表露愛意後，為伊莉莎白和國家祈福。當示意行刑的炮聲響起，她步向劊子手慷慨就義。